thermo FastDigest SalI快速內(nèi)切酶貨號(hào)FD0644

單位：200U

賽默飛世爾科技近期推出Thermo Scientific Fermentas FastDigest快速酶，是為快速DNA酶切專(zhuān)門(mén)研發(fā)的進(jìn)階版限制性?xún)?nèi)切酶。在30年的內(nèi)切酶研究當(dāng)中，我們積累的限制性?xún)?nèi)切酶生產(chǎn)菌株庫(kù)是業(yè)內(nèi)zui大的限制性?xún)?nèi)切酶生產(chǎn)菌株庫(kù)之一。大量可供選擇的同裂酶和優(yōu)異的生產(chǎn)能力促進(jìn)了這個(gè)包含176種FastDigest快酶的*系統(tǒng)的誕生。

       所有FastDigest快速酶在通用的FastDigest緩沖液和FastDigest Green綠色緩沖液中都具有100%活性，并可在5-15分鐘內(nèi)迅速完成酶切。這就使得任意限制酶組合都能夠在同一反應(yīng)管中同時(shí)反應(yīng)，避免了連續(xù)酶切。此外，F(xiàn)astDigest Green綠色緩沖液兼具上樣緩沖液的功能，可直接將反應(yīng)物上樣凝膠電泳，操作更為便利。

        FastDigest快速酶可用于酶切質(zhì)粒、基因組DNA、病毒DNA以及PCR產(chǎn)物。酶切時(shí)間和實(shí)驗(yàn)方案已經(jīng)過(guò)實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證，每種快速酶及其作用的模板都有相應(yīng)的酶切時(shí)間和實(shí)驗(yàn)方案提供。FastDigest系列尤其適合對(duì)于反應(yīng)組分純度、性能穩(wěn)定性和反應(yīng)體系配制簡(jiǎn)單化要求*的應(yīng)用。
 

thermo FastDigest SalI快速內(nèi)切酶貨號(hào)FD0644

應(yīng)用
 

• 快速克隆分析
• 快速制備克隆用DNA
• PCR產(chǎn)物酶切
• 快速RFLP基因分型
• 難切割DNA片段的酶切

通用緩沖液和直接凝膠上樣

所有FastDigest快酶在FastDigest Green綠色緩沖液中都具有100%活性。此外FastDigest Green綠色緩沖液中還包含密度試劑和兩種示蹤染料，從而可直接將反應(yīng)產(chǎn)物添加到點(diǎn)樣孔中。藍(lán)色染料在1%瓊脂糖凝膠

中的遷移率與3-5kb DNA片段接近， 并在424nm時(shí)出現(xiàn)激發(fā)峰；而黃色染料在1%瓊脂糖凝膠中的遷移速度稍快于10bp DNA片段，在615nm時(shí)出現(xiàn)激發(fā)峰。

FastDigest Green綠色緩沖液和無(wú)色緩沖液一樣可進(jìn)行高性能的DNA酶切和下游應(yīng)用。對(duì)于需要用熒光激發(fā)進(jìn)行酶切產(chǎn)物分析的應(yīng)用（例如，在紫外光下測(cè)量濃度），我們建議使用無(wú)色的FastDigest緩沖液。
 
 

FastDigest Green綠色緩沖液
含有FastDigest Green綠色緩沖液的反應(yīng)混合物
A: 電泳前，加入點(diǎn)樣孔中的反應(yīng)混合物；B: 電泳后，在凝膠中得到分離的條帶




用FastDigest快速酶在FastDigest Green綠色緩沖液中5分鐘內(nèi)進(jìn)行質(zhì)粒DNA的三重酶切和連接

M：Thermo Scientific Fermentas GeneRuler Express DNA Ladder （#SM1551）
C：未酶切的質(zhì)粒DNA對(duì)照
1：在FastDigest緩沖液中用FastDigest EcoRI、FastDigest KpnI和FastDigest SmaI對(duì)質(zhì)粒DNA進(jìn)行三重酶切；2：在FastDigest緩沖液中的酶切和連接反應(yīng)混合物
3：在FastDigest Green綠色緩沖液中用FastDigest EcoRI、FastDigest KpnI和FastDigest SmaI對(duì)質(zhì)粒DNA進(jìn)行三重酶切；4：在FastDigest Green綠色緩沖液中的酶切和連接反應(yīng)混合物
 

5分鐘內(nèi)酶切DNA
 

• 在1種緩沖液中5-15分鐘內(nèi)可 進(jìn)行雙重和多重酶切
• 高通量應(yīng)用的理想選擇
• 所有種類(lèi)的DNA模板都提供相應(yīng)的酶切時(shí)間：質(zhì)粒DNA、PCR產(chǎn)物、基因組DNA
• 任何模板都不需要酶切過(guò)夜
• 沒(méi)有星活性——無(wú)需延長(zhǎng)孵育時(shí)間

用FastDigest酶和傳統(tǒng)內(nèi)切酶進(jìn)行質(zhì)粒DNA酶切的比較

M：GeneRulerTM 1kb Plus DNA Ladder；C：未酶切的質(zhì)粒DNA
1：用FastDigest Xhol 5分鐘內(nèi)酶切質(zhì)粒DNA；2：用FastDigest ApaI 5分鐘內(nèi)酶切質(zhì)粒DNA
3：用FastDigest Xhol和FastDigest ApaI 5分鐘內(nèi)雙酶切質(zhì)粒DNA；4：用Apal酶切質(zhì)粒DNA 1小時(shí)
5：用Xhol酶切質(zhì)粒DNA 1小時(shí)；6：在1X Tango緩沖液中用4倍的ApaI過(guò)量酶切質(zhì)粒DNA 1小時(shí)，然后在2X Tango緩沖液中用XhoI再酶切1小時(shí)
 

雙酶切可節(jié)省超過(guò)2個(gè)小時(shí)

 

FastDigest限制性?xún)?nèi)切酶為DNA酶建立新的標(biāo)準(zhǔn)